De populariteit van deze kennisquiz is vooral te danken aan het ijzersterke concept. Eén kandidaat neemt het op tegen 100 tegenspelers in het publiek. Presentatrice Caroline Tensen stelt de vragen. Bij elk goed antwoord speelt hij of zij iemand weg. Belangrijkste is dat voortaan niet alleen de hoofdkandidaat naast Caroline, maar ook de 100 kandidaten op de tribune geld kunnen winnen. Want telkens als de hoofdkandidaat afvalt, mogen de spelers op de tribune die nog in het spel zitten onderling € 5.000,- verdelen. En dit gewonnen bedrag kan aardig oplopen want alle 100 spelers op de tribune blijven de hele serie zitten. Dus ook op de tribune maakt men 9 afleveringen lang kans op om bij elke nieuwe kandidaat geld te verdienen.
Een andere belangrijke wijziging zijn de vragen. Voorheen had de hoofdkandidaat de keuze uit een makkelijke of moeilijke vraag. Dat is nu anders; voortaan krijgt de kandidaat bij elke nieuwe vraag de keuze uit 2 opties: De ene keer kun je kiezen uit 2 categorieën, de andere keer uit bijvoorbeeld 2 foto’s of 2 geluidsfragmenten. Maar ook de makkelijk/moeilijk optie komt nog steeds voorbij.
Als de kandidaat niet zeker van zijn zaak is, kan hij nog steeds gebruikmaken van 3 escapes.
Tijdens elke aflevering van Postcode Loterij Eén tegen 100 worden 2 van de 147 goede doelen van de Postcode Loterij uitgelicht. Daarnaast worden iedere week nieuwe winnaars van de PostcodeStraatprijs bekend gemaakt. Oftewel, niet alleen de mensen in de studio kunnen prijzen winnen.
